Laser microdissection of grapevine leaf phloem infected by stolbur reveals site-specific gene responses associated to sucrose transport and metabolism.

Lo scopo del presente lavoro è stato quello di ottimizzare un approccio tessuto-specifico per analizzare l’espressione genica nel floema fogliare di piante di vite sane e infette con Bois Noir. In particolare, la nostra analisi si è concentrata su alcuni geni del trasporto e del metabolismo del saccarosio. L’analisi funzionale è stata possibile grazie all’isolamento, mediante microdissezione laser, delle cellule del parenchima floematico e dei complessi cellula compagna-tubo cribroso da sezioni di foglie incluse in paraffina. La tecnica ha consentito una risoluzione cellula-specifica dell’espressione genica, fondamentale per l’analisi delle risposte limitate a un particolare tessuto o cellula.

Aim of the present work was to optimize a tissue-specific approach to analyse gene expression in the leaf phloem of Bois Noir infected and healthy grapevine plants. In particular, our analysis focused on some genes of sucrose transport and metabolism. Functional analysis was permitted by the isolation of phloem parenchyma cells and companion cell-sieve element complexes from paraffin-embedded leaf sections by laser microdissection. This technique allowed cell-specific resolution of gene expression, which is critical for the analysis of responses that are restricted to a particular tissue or cell.